HPLC是上世紀六七十年代發展起來的新型分離分析技術，廣泛應用在制藥、化工、環境、食品等領域，各行業實驗室均能看到大量HPLC身影。

HPLC系統由脫氣機（內置、外置）、泵、自動（手動）進樣器、柱溫箱（選配）、檢測器、數據處理系統等模塊構成。

HPLC管理篇

1、人員的培訓與管理

參與實驗室管理的人員應對儀器足夠了解，如有條件應參加廠商的高階培訓，熟練使用與維護儀器。凡申請使用儀器的人員應接受相關培訓，對學過《儀器分析》課程的申用人可著重講解使用中應注意的問題，對于未學過《儀器分析》課程的申用人可先在教學平臺中學習相關課程，并接受強化培訓后方可使用儀器，避免不熟悉儀器直接使用對儀器造成不可修復的破壞。

2、機器的管理

針對每臺儀器建立檔案及標準操作規程SOP，每臺HPLC檔案需包括：品牌、產地、主體流路材質（兼容溶劑）、耐壓范圍、正相系統或反相系統（主要看泵密封圈材質）、客服電話、對應維修工程師及應用工程師的聯系方式。保證出現問題時快速聯系獲取解決方案，將儀器的損害盡可能的降低。

HPLC主體流路材質一般有不銹鋼SST、鈦Ti或MP35N（MP35N合金是一種無磁的鎳鈷鉻鉬合金），普通液相系統無特殊說明一般為不銹鋼系統，鈦或MP35N多用于BioHPLC系統中，比不銹鋼系統更耐腐蝕，和更好的生物兼容性。

針對每臺儀器編寫完整的操作規程，應涉及到電壓、開關機順序及注意事項，使用人在申用儀器時應注意儀器的情況，發現問題及時記錄并上報。對儀器的使用和維護記錄嚴格審核。

3、物料管理

所有進入液相色譜系統的溶劑均應是色譜純，樣品應經過相應的前處理，確保樣品的潔凈度，不會堵塞和污染系統。使用的進樣小瓶規格要與自動進樣器匹配，瓶子隔墊要與樣品溶劑兼容。如需過濾，應選擇與溶劑兼容的濾膜材質，避免濾膜溶脹或反應等結果導致樣品污染或系統堵塞等問題。

4、相關規定

（1）儀器申用的規范化預約：有電子平臺在電子平臺上申請預約，沒電子平臺可制定手工或電子臺賬記錄具體情況。（2）制定并嚴格執行實驗室管理規定。（3）嚴格按照儀器SOP規定使用。（4）完善使用記錄的書寫，執行復核審查。（5）儀器的維護規程的制定與執行。

5、環境要求

儀器使用環境應無塵，通風良好，溫度保持在（15-30）℃，室內相對濕度應在5%-85%范圍內，儀器應平穩的放在試驗臺上，周圍無強烈機械振動和電磁干擾源。電壓應符合響應廠商的安裝使用要求。

HPLC維護篇

目前各廠商生產制造的液相色譜儀主要分兩類，一類是一體機，另一類是模塊化分體機。一體機體積小巧、安裝、移機便捷；分體機維修方便，各有優勢。對于這兩類液相系統總體維護是相似的。

1、脫氣機的維護

為避免脫氣機污染，應嚴格過濾并定期更新溶劑，定期潤洗脫氣機溶劑通道，對于走水相的通道這點非常重要。使用有機溶劑充分的潤洗所有通道（使用干凈的溶劑瓶），在使用水和乙腈或甲醇作為流動相時每周充分潤洗脫氣機通道一次。然而在色譜中反復出現鬼峰時，應及時調整潤洗周期，并按下面的步驟進行相應的潤洗。（1）在泵出口安裝背壓管，并調整壓力至200-300bar。（2）用20%的硝酸在常規流速下沖洗1小時（使用新鮮的HPLC級水）。（3）用HPLC級水潤洗通道知道PH測試為中性。（4）再用HPLC級乙腈在常規流速下潤洗2小時。（5）用干凈的溶劑瓶裝上新配置的流動相并與脫氣機連接。（6）安裝新的溶劑過濾器。（7）拆除背壓管并重新按照要求連接系統。（8）平衡系統。

有些品牌的液相色譜儀只有反相脫氣包，當使用正相系統時，要求短接脫氣機。有些品牌亦有正相脫氣包，使用時應注意，避免溶劑對脫氣包材質造成不可逆的損壞。

2、溶劑吸濾頭維護

室溫較高時，使用純水相或有機相比例較低時，流動相應臨用現配及時清洗吸濾頭以防吸濾頭堵塞。

定期檢查溶劑過濾頭，尤其是水及相似溶劑作為流動相時，細菌等微生物及其代謝產物容易沉淀堵塞濾頭。所以定期更換溶劑，并在清潔溶劑瓶后重新裝入新的溶劑，必要時，更換新的溶劑濾頭。

3、泵的維護

泵的易損件主要為單向閥、過濾白頭、柱塞桿、柱塞密封圈等，做好泵頭的維護，反相系統使用緩沖鹽時應使用seal wash清洗，如沒有自動后密封清洗系統，可以手動清洗，當使用正相系統時選擇適宜的溶劑清洗。

應注意有些品牌的后密封清洗系統的溶劑瓶是循環的，有些品牌是非循環利用的，對于循環式的后密封清洗系統應定期更換儲液瓶中的溶劑，避免溶劑中緩沖鹽濃度過高起不到清洗的作用，以及溶劑瓶中滋生微生物。對于非循環的溶劑瓶除了定期更換溶劑外還應注意，不要讓溶劑瓶中的溶劑跑空。

如果要使用了高濃度鹽類流動相（通常最大不超過1moL/L），在后密封清洗系統沒有充分運行（大于5min）的情況下，嚴禁運行泵，否則將造成柱塞桿及柱塞密封的損壞。

泵的部件中有peek（聚醚醚酮）材質組件，在使用氯仿，四氫呋喃THF，二甲基亞砜DMSO等溶劑時，peek材質的管線或其他部件會發生溶脹現象，建議更換耐受以上溶劑的不銹鋼備件或鈦或者MP35N等材質的備件。

4、Purge閥維修

不要用工具來擰緊purge閥，過緊可能會損壞密封墊，并且必須在系統壓力為0時的情況打開或者關閉purge閥。

5、在線過濾器

purge中含有在線過濾器，當系統背壓高時考慮更換新的在線過濾器濾芯。有些品牌是主動閥或者被動閥，需要更換閥中的過濾白頭。

通常情況下，泵的柱塞密封墊由極高分子量聚乙烯（UHMW-PE）材料制成。當使用氯仿、三氯代苯、二氯甲烷、四氫呋喃或甲苯做溶劑時會對UHMW-PE密封墊造成化學損傷。在使用四氯化碳、二乙醚、乙醚、二異丙醚、酮類、甲苯、甲基環已胺及氯苯時還可能發生化學反應。不同制造商的密封墊材質有不同，有些是PTFE材質的還有石墨的。

6、自動進樣器的維護

不同品牌的自動進樣器結構有所差異，應詳見廠商說明書做好維護。洗針液應定期更換，當使用內插管進樣瓶時，應及時調整進樣針高度，避免對硬件造成損傷，當出現進樣體積重復性不好的情況時，排除儀器故障問題，由于進樣瓶內負壓造成的，對于高沸點難揮發的樣品可選用欲開口進樣隔墊。定期檢查進樣針位置，防止進樣時扎偏損壞硬件。

溶劑的選擇：所有不銹鋼、鈦合金、及寶石PCTFE聚三氟氯乙烯、PTFE聚四氟乙烯、peek聚醚醚酮等材質制造的部件都長期浸泡在溶劑中。

必須使用與管道材質匹配的標準試劑和緩沖鹽溶液。特別注意類似高粘度、低沸點、有紫外吸收（UV-VIS檢測器）、高折射率（RID檢測器）及可揮發溶劑（脫氣機），高濃度緩沖鹽溶劑，通常最大不超過1moL/L，使用時應確認后密封清洗系統運行再正確的清洗溶劑上。

自動進樣器大致分為兩類：不帶溫控的自動進樣器和帶溫控的自動進樣器。對于可進行溫控的自動進樣器要注意及時清理冷凝水，定期清洗樣品盤避免進樣針堵塞，針座漏液需要更換針座密封，針座堵了可以通過反沖的方式解決。進樣閥如漏液需更換進樣閥轉子密封等組件。

7、柱溫箱的維護

一般沒有需要特殊維護的地方。

8、檢測器的維護

檢測器需要維護的部件主要是燈和流通池。定期檢測燈能量，必要時更換燈。當結果譜圖出現異常時確認是否是流通池污染導致的，及時清洗流通池。

---本文摘自《實驗與分析》